Biblioteca inmunizada con nanocuerpos

El flujo de trabajo típico para el descubrimiento de nanocuerpos mediante el uso de una biblioteca inmunizada incluye los siguientes pasos clave.

Inmunización animal
El primer paso es inmunizar camellos o tiburones con el antígeno de interés. Trabajamos en estrecha colaboración con nuestros clientes para diseñar un plan de inmunización optimizado que se adapte a su antígeno específico de interés. Seleccionamos cuidadosamente la especie animal y el régimen de inmunización más adecuados para asegurar una respuesta inmunológica fuerte y específica.

Recopilación de células de sangre periférica
Después de la inmunización animal, recolectamos células de sangre periférica de los animales. Las células de sangre periférica son aisladas de la sangre completa utilizando técnicas de laboratorio estándar y contienen células inmunológicas, incluyendo células B que producen anticuerpos contra el antígeno de interés.

Construcción de la biblioteca
A continuación, utilizamos las células de sangre periférica recolectadas de los animales para generar una biblioteca de nanocuerpos. Utilizamos técnicas y tecnologías avanzadas para construir una biblioteca de nanocuerpos altamente diversa y representativa. Esto incluye la separación del ARN mensajero de las células inmunológicas y su conversión en ADN complementario mediante PCR. El ADN amplificado se clona en un vector para crear la biblioteca de nanocuerpos.

Selección de nanocuerpos
Una vez finalizada la construcción de la biblioteca, utilizamos técnicas de cribado de alto rendimiento para identificar nanocuerpos con alta afinidad y especificidad para detectar el antígeno de interés. Utilizamos técnicas avanzadas como la tecnología de exposición de fagos para identificar rápidamente los nanocuerpos de unión adecuados en la biblioteca y realizamos múltiples rondas de cribado y optimización para mejorar aún más las propiedades de unión de los nanocuerpos seleccionados.

Producción y purificación de nanocuerpos
Una vez que se han identificado los nanocuerpos deseados, los producimos en grandes cantidades utilizando un sistema de expresión de proteínas recombinantes. Esto implica clonar los nanocuerpos seleccionados en un vector de expresión y transfectarlos en células huésped. Luego, utilizamos técnicas de laboratorio estándar para purificar los nanocuerpos a un nivel de alta pureza.

Validación de anticuerpos
Finalmente, validamos la especificidad de unión y la funcionalidad de los nanocuerpos seleccionados. Utilizamos una variedad de técnicas, como ELISA, Western blotting y ensayos funcionales, para confirmar las propiedades de unión de los nanocuerpos seleccionados. Trabajamos en estrecha colaboración con nuestros clientes para asegurarnos de que los nanocuerpos seleccionados cumplan con sus necesidades y requisitos específicos.

Durante todo el flujo de trabajo, nuestro equipo de expertos trabaja en estrecha colaboración con los clientes para asegurarse de que se satisfagan sus necesidades y requisitos específicos. Actualizamos regularmente el progreso del proyecto y nos comprometemos a proporcionar resultados de alta calidad y confiables de manera oportuna.