Biblioteca ingenua de nanocuerpos

El flujo de trabajo típico para descubrir nanocuerpos utilizando una biblioteca ingenua se puede dividir en los siguientes pasos:

Selección de nanocuerpos
Luego se utiliza un proceso llamado biopanning para seleccionar la biblioteca ingenua de nanocuerpos contra el antígeno de interés. Esto implica incubar la biblioteca con el antígeno objetivo, y luego lavar para eliminar cualquier unión no específica. Los nanocuerpos restantes se eluyen y amplifican, y este proceso se repite en varias rondas para enriquecer los nanocuerpos de alta afinidad.

Producción y purificación de nanocuerpos
Una vez que se han identificado nanocuerpos de alta afinidad y especificidad, se producen en grandes cantidades mediante un sistema de expresión de proteínas recombinantes. Esto implica clonar los anticuerpos seleccionados en un vector de expresión y luego transfectar células hospedadoras. A continuación, los anticuerpos se purifican utilizando técnicas de laboratorio estándar para obtener un alto nivel de pureza.

Validación de anticuerpos
Finalmente, validamos la especificidad y funcionalidad de los nanocuerpos seleccionados utilizando varios métodos. Utilizamos técnicas como ELISA, Western blotting y pruebas funcionales para confirmar las propiedades de unión de los anticuerpos. Trabajamos en estrecha colaboración con los clientes para asegurarnos de que los anticuerpos seleccionados cumplan con sus necesidades y requisitos específicos.

En general, el descubrimiento de nanocuerpos utilizando una biblioteca ingenua es una técnica poderosa que puede generar complejos de unión altamente específicos y estables, con una amplia gama de posibles aplicaciones.

Aspectos destacados del servicio

  • Biblioteca ingenua Megadiversa de VHH, que contiene 4,7 × 10^11 clones únicos de VHH, determinados mediante NGS
  • La biblioteca se obtuvo a partir de 77 animales sanos de la familia de los camélidos no inmunizados (51 alpacas, 13 llamas y 13 camellos)
  • Casi una tasa de inserción del 100% de VHH

Nuestro servicio de selección de biblioteca ingenua incluye lo siguiente:

  • Análisis del antígeno proporcionado por el cliente
  • 4 rondas de selección
  • Pruebas ELISA en 192 clones aleatorios
  • Secuenciación de hasta 50 clones positivos

Tiempo de rotación del servicio de descubrimiento

Número de fase Proyecto Cronograma Entregables
I Preparación de antígenos Por determinar Informes de control de calidad
II Cribado de ligandos específicos de antígeno ~3 semanas Fagos específicos de antígeno enriquecidos después de 3-4 rondas de selección
III Identificación y validación de ligandos de unión ~3 semanas Secuencias de clones positivos, validación de la bioactividad
IV Análisis de datos y redacción de informes ~1 semanas Informe final del proyecto
  Total El descubrimiento de la biblioteca de